همسانه سازی و بیان ژن زیر واحد اتصالی سم شبه شیگا نوع ۲ و بررسی ایمنی زایی آن در مدل حیوانی

Authors

rouhollah kazemi

department of plant bioproducts, institute of agricultural biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iran asal akahavian tehrani

department of plant bioproducts, institute of agricultural biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iran mahyat jafari

department of plant bioproducts, institute of agricultural biotechnology, national institute of genetic engineering and biotechnology (nigeb), tehran, iran jafar amani

applied microbiology research center, baqiyatallah university of medical sciences, tehran, iran amir mousavi

abstract

هدف: اشریشیا کلی انتروهموراژیک با قدرت تولید سم شبه شیگا نوع ۲ عامل اصلی اسهال خونی باکتریایی است. این عامل بیمازی‏زا در برخی موارد می تواند منجر به نشانگان اورمی همولیتیک و نارسایی کلیوی با درجه مرگ و میر بالا شود. تولید سم شبه شیگا نوع ۲ اصلی ترین عامل بیماری زایی سویه های اشریشیا کلی انتروهموراژیک است و از این رو خنثی سازی سم با آنتی بادی های سرمی اختصاصی به عنوان راه‏کار اصلی در روش های پیشگیری و درمان ضد نشانگان اورمی همولیتیک مطرح است. در این تحقیق، همسانه سازی، بیان پروتئین نوترکیب، خالص سازی و ایمنی زایی زیرواحد b سم شبه شیگا نوع ۲ (stx2b) که عامل اتصال سم به سلول های هدف است، شرح داده شده است. مواد و روش ها: ژن stx2b با استفاده از pcr تکثیر و در ناقل بیانی pet28a همسانه سازی و ناقل بیانی به اشریشیا کلی bl21-de3 منتقل شد. پروتئین نوترکیب rstx2b پس از ارزیابی بیان با استفاده از ستون نیکل خالص سازی شد. پروتئین rstx2b تخلیص شده به عنوان کاندید ایمنی زایی به روش زیرپوستی در سه مرحله به موش های نژاد balb/c تزریق شد. تولید آنتی بادی سرمی ضد rstx2b در خون موش های ایمن شده با استفاده از آزمون الایزا ارزیابی شد. خنثی سازی سم در شرایط آزمایشگاهی روی سلول های hela و در شرایط درون بدنی با آزمون چالش موش های ایمن با سم شبه شیگا نوع ۲ بررسی شد. نتایج: با بررسی میزان igg القا پاسخ ایمنی عمومی در موش های ایمن شده تأیید شد. نتایج آزمون سلول های hela نشان داد که سرم موش های ایمن قادر به خنثی سازی سم است. در آزمون چالش حدود ۷۰ درصد از موش های ایمن زنده ماندند. نتیجه گیری: نتایج نشان داد که پروتئین نوترکیب rstx2b می تواند منجر به القای پاسخ ایمنی خنثی کننده در موش شود و می تواند به عنوان یکی از اجزای اصلی واکسن علیه اشریشیا کلی انتروهموراژیک به کار برده شود.

Upgrade to premium to download articles

Sign up to access the full text

Already have an account?login

similar resources

ایمنی زائی آنتی ژنهای نوترکیب سیستم ترشحی نوع 3 و زیر واحد اتصالی سم شبه شیگا از باکتری E.coli O157 H7

سابقه و هدف: انتروهموراژیک اشرشیاکلی (EHEC) باعث اسهال و سندرم همولیتیک اورمیک می شود. با توجه به خطرات ناشی از درمان آنتی بیوتیکی در عفونت EHEC O157: H7، واکسن ها روشی امید بخش برای پیشگیری از عفونت را ارائه می کنند. هدف از این مطالعه بررسی ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب Intimin،EspA وStx2b در برابر عفونت باکتری E.coli O157 H7 می باشد. مواد و روش­ها: در این مطالعه تحقیقی، بیان پروتئین های نوتر...

full text

همسانه سازی، بررسی بیوانفورماتیکی و بیان ژن زیر واحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون I اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC

زمینه و هدف: اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (ETEC) عامل اصلی اسهال کودکان در کشورهای در حال توسعه و مسافران به این مناطق می‌باشد. از طریق ساختارهای سطحی به نام فاکتورهای کلونیزاسیون به سلول‌های میزبان متصل می شود. اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک در بسیاری از مناطق شیوع فاکتور کلونیزاسیون نوع یک (CFA/I) از سایر فاکتورهای کلونیزاسیون بیشتر می باشد و این ترکیب به عنوان ترکیب کلیدی در تولید واکسن محسوب می‌گرد...

full text

همسانه سازی، بررسی بیوانفورماتیکی و بیان ژن زیر واحد اصلی فاکتور کلونیزاسیون i اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (etec

زمینه و هدف: اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک (etec) عامل اصلی اسهال کودکان در کشورهای در حال توسعه و مسافران به این مناطق می باشد. از طریق ساختارهای سطحی به نام فاکتورهای کلونیزاسیون به سلول های میزبان متصل می شود. اشرشیاکولی انتروتوکسیژنیک در بسیاری از مناطق شیوع فاکتور کلونیزاسیون نوع یک (cfa/i) از سایر فاکتورهای کلونیزاسیون بیشتر می باشد و این ترکیب به عنوان ترکیب کلیدی در تولید واکسن محسوب می گرد...

full text

بررسی و مقایسه میزان ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب زیر واحد اتصالی توکسین های کزاز و بوتولینیوم)تایپ (A

مقدمه: تنها واکسن موجود علیه تتانواسپاسمین(عامل اصلی بیماری کشنده کزاز) توکسوئید آن است که مصونیت 10 ساله ایجاد می کند. در حالی که توکسوئید بوتولینوم(عامل بیماری کشنده بوتولیسم) تنها مصونیت 2 ساله ایجاد مصونیت می نماید. این دو توکسین با 36 درصد همولوژی در یک خانواده قرار دارند اما خاطره ایمنی و میزان پاسخ ایمنی هومورال و احتمالاً میزان تولید آنتی ‌بادی علیه هر کدام متفاوت می باشد. هدف از مطالعه ...

full text

ارزیابی و مقایسه میزان ایمنی زایی پروتئین های نوترکیب زیر واحد اتصالی توکسین های اشریشیا کلی و بوتولینیوم تایپ

زمینه و هدف: در میان عوامل باکتریایی، شایع ترین عامل بیماری اسهال، باکتری اشریشیاکلی انتروتوکسیژنیک است. زیر واحد LTB سم این باکتری قادر به ایجاد مصونیتی شش ماهه است. کلستریدیوم بوتولینوم نیز عامل بیماری کشنده بوتولیسم می باشد و زیر واحد BoNT/A-Hc سم آن می تواند تا دو سال در برابر این بیماری مصونیت ایجاد کند. میزان ایمنی زایی که هر یک از این زیر واحدهای نوترکیب ایجاد می کنند، می تواند از عواملی...

full text

همسانه سازی و بیان ناحیه اتصالی نوروتوکسین نوع b باکتری کلستریدیوم بوتولینوم در باکتری e. coli

پیش زمینه و هدف: سندرم بوتولیسم توسط نوروتوکسین های باکتری کلستریدیوم بوتولینوم ایجاد می شود. این نوروتوکسین ها دارای هفت سروتیپ از a – g می باشند. بهترین راه برای جلوگیری از سندرم بوتولیسم ایجاد شده توسط bont/b استفاده از واکسن های نوترکیب ساخته شده ی ناحیه اتصالی آن می باشد. چون دارای اپی توپ های کافی برای تحریک سیستم ایمنی می باشد.مواد و روش ها: ابتدا سکانس ژن ناحیه اتصالی را از سایت ncbi گر...

full text

My Resources

Save resource for easier access later


Journal title:
پژوهش های آسیب شناسی زیستی

جلد ۱۸، شماره ۴، صفحات ۴۵-۶۰

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023